喀麦隆本地母羊卵泡数量和卵母细胞质量的决定因素

摘要

本研究对喀麦隆阿达马瓦地区恩冈德雷87只当地母羊的卵巢潜能进行了评估在体外卵母细胞生产。卵巢切除，浸泡在生理盐水溶液(0.9%)中，并运送到实验室进行详细评估。对每个卵巢上的卵泡进行计数，测量其直径(Φ)，并将其分为小(Φ < 2mm)、中(2≥Φ≤4mm)和大(4> Φ≤10mm) 3类。然后将每个卵巢切片放入培养皿中;将卵母细胞置于Dulbecco 's磷酸盐缓冲盐水中，在立体镜(x10)下检查，并根据卵母细胞形态和细胞质变化将卵母细胞分为四组。测定卵巢(卵巢定位、黄体、卵巢大小和重量)和非卵巢因素(品种、年龄、体况评分(BCS)和妊娠状况)对卵泡数量和卵母细胞恢复率的影响。每个卵巢平均卵泡数为8.80±2.97个。小、中、大卵泡数分别为6.13±2.90个;分别为1.60±0.49和1.06±0.05。每卵巢卵母细胞回收率为6.04±1.01。 Oocytes graded I, II, III and IV were 1.20 ± 0.18 (11%); 1.23 ± 0.23(14%); 1.13 ± 0.12 (7%)and 2.47 ± 0.93 (68%), respectively. The oocyte quality index was 1.98. Younger, non-pregnant ewes with a body condition score of 3 and large ovaries presented higher number of follicles and oocytes. Oocytes (grades I and II) acceptable for in vitro embryo production (IVEP) constituted 25% of the harvest. This study indicates that some factors such as age, body condition score, pregnancy status, ovarian localization, weight of ovary and corpus luteum must be taken into account to increase the potential of the ovary for IVEP.

关键字

本地母羊，卵泡数量，卵母细胞质量，卵巢

介绍

在喀麦隆，小反刍动物的数量估计在700万头左右，其中包括320万只羊[1]。遇到的绵羊品种包括Djallonke、Wayla和Ouda品种的富拉尼、Mayo Kebbi和Kirdi。它们通常被称为“穷人的肉”[2]。然而，这种育种面临着许多问题，特别是在没有任何生物技术(特别是人工授精、体外受精和胚胎移植)帮助的情况下，生殖保持自然[3]。使用这些生殖生物技术的优势在于，它大大增加了畜群的规模，同时有助于保存欠育或死亡动物的遗传遗产[4]。

事实上，卵巢可以被认为是一种可持续和廉价的资源，可以用于研究生殖、保存和细胞冷冻等生物技术的发展和应用。[5]．从被屠宰的雌性卵巢中收集的卵母细胞可以产生胚胎并移植到受体雌性体内。然而，辅助生殖技术的发展和应用，如在体外胚产生(IVEP在体外成熟(IVM),在体外体外受精(IVF)和体外培养可以彻底改变家畜的研究[6]。此外，良好胚胎的产生必然需要更高质量的卵母细胞[7]。第一步也是最重要的一步在体外受精是选择能够成熟的有活力的卵母细胞在体外[8]。在撒哈拉以南非洲，卵母细胞的回收率很低，胚胎生产的成本也很低在体外高[9]。据我们所知，喀麦隆本地母羊的卵泡和卵母细胞的特征尚未进行过研究。因此，本研究的目的是确定当地绵羊卵巢产生卵母细胞的潜力在体外在喀麦隆。具体来说，我们将确定卵泡数量和卵母细胞恢复率;评估卵巢和非卵巢参数对卵泡数量、卵母细胞产量和质量的影响。

材料与方法

研究区域

本研究使用了在banta小型反刍动物屠宰场采集的母羊样本，并在喀麦隆阿达马瓦地区的生化分析实验室(ADAM’s LABO)进行了分析。恩oundere是阿达马瓦地区的主要城镇，位于北纬7°19'39和东经13°35'4E之间，年平均降雨量为1496.7毫米。气温15.2℃~ 29℃，平均湿度58.2%。该研究于2019年11月至2020年1月进行。屠宰的母羊分别来自Vina区(62.1%)、Mayo Rey区(31%)和Mbam和Kim区(6.9%)。

动物特征

本研究共选取87只不同品种的当地母羊[Djallonke(67)、Peul(8)、Kirdi(8)和Mayo Kebbi(4)]。动物的平均活重采用精度为1公斤的机械口袋秤100Kg测量。体况评分(BCS)和年龄按照Russel的描述进行测定等．[10]和Salami[11]。妊娠母羊胎龄按公式X = 2.1 (y + 17)确定，y代表颅尾长度(cm)， X代表妊娠持续时间(天)[12]，妊娠时间分为≤50天、51 ~ 100天和>100天三组。

卵巢采集及处理

屠宰后，用剪刀切除左右卵巢，分别放入装有水洗培养基(WM)的锥形管中，并在屠宰后2小时内在35-37°C下运送到实验室。所有囊性卵巢(卵泡>10 mm的Φ)均被排除在研究之外[13]。

测定卵巢的重量和大小

在实验室中，将卵巢从试管中取出并置于培养皿中，仔细修剪卵巢上多余的组织，并用精度为0.01的电子数字秤称卵巢的重量。采用碳纤维复合材料数字卡尺等数字卡尺测量卵巢的长度、宽度和厚度，并将卵巢分为两个尺寸组(<1.70x 1.26x 0.75和>1.70x 1.26x 0.75)。黄体有三种类型:白色、出血性和黄色。

卵泡数量的测定

用洗涤液冲洗卵巢。对每个卵巢进行可见卵泡计数，并用数字卡尺测量卵泡直径(Φs)。根据Mohamed的描述，将卵泡Φs分为小(<2 mm)、中([2 ~ 4]mm)和大([4 ~ 10]mm) 3类等．[14]。

卵母细胞的恢复和分级

将卵巢置于单独的含有Dulbecco 's Phosphate Buffered Saline (DPBS)的塑料培养皿中，采用切片技术收集卵母细胞[13]。在立体镜(x10)下评估卵母细胞质量，并根据Khandoker描述的细胞质和积云细胞层的均匀性分为四个等级(G)et al。[15]。I级(GI):卵母细胞有4层以上致密的束状积云细胞团，胞浆颗粒均匀;II级(GII):卵母细胞至少有2-4层致密的积云细胞团，胞浆颗粒均匀;III级(GIII):卵母细胞至少有一层致密的卵丘细胞团，胞浆颗粒均匀;IV级(GIV):卵母细胞脱落，无积云细胞或积云细胞层不完整或细胞膨大，细胞质暗或颗粒状不均匀。综合质量以Baki Acar公式[(g1 × 1 + g1 × 2 + g1 × 3 + g1 × 4) /回收卵母细胞总数]为指标计算等．[16]。指标值趋近于1，表明卵母细胞质量良好。

统计分析

数据分析使用SPSS (Statistical Package for Social Sciences) Version 25.0。采用方差分析和邓肯检验统计量对适当的数据集进行分析。差异有统计学意义，P <0.05。

结果

屠宰母羊的特征

母羊平均活重(Kg)、BCS和年龄(岁)为27.25±4.16;分别为2.44±0.54和2.71±1.33。妊娠率68%，平均胎龄72天左右。

卵巢平均重量(g)为1.16±0.49。右卵巢(1.18±0.45 g)较左卵巢(1.15±0.55 g)重，长(1.7±0.25)、宽(1.26±0.18)、厚(0.75±0.14)cm。妊娠母羊卵巢明显大于未妊娠母羊(P<0.05)(表1)。

表1。卵巢重量和大小、品种、BCS、年龄、妊娠状况和黄体的平均值±SD值

参数	变量	N	左卵巢重量(g)	右卵巢重量(g)	每只动物卵巢重量(g)	子房长度(cm)	子房宽度(cm)	子房厚度(cm)
品种	Djallonke	67	1.13±0.53^ab	1.19±0.44^一个	1.16±0.38^ab	1.69±0.24^一个	1.27±0.17^b	0.75±0.14^ab
	Kirdi	8	0.78±0.51^一个	0.97±0.46^一个	0.87±0.46^一个	1.51±0.18^一个	1.07±0.05^一个	0.64±0.06^一个
	梅奥科吉	4	1.47±0.30^b	0.95±0.44^一个	1.21±0.34^ab	1.71±0.16^一个	1.20±0.13^b	0.74±0.10^ab
	Peul	8	1.52±0.59^ab	1.48±0.45^一个	1.50±0.41^b	2.01±0.15^b	1.48±0.17^c	0.85±0.15^b
	假定值		0.045	0.095	0.039	0.001	0.000	0.019
BCS	1(薄)	2	1.60±0.01^一个	1.64±0.05^一个	1.62±0.03^一个	1.83±0.04^一个	1.35±0.05^一个	0.72±0.11^一个
	2(中)	45	1.13±0.54^一个	1.18±0.42^一个	1.16±0.39^一个	1.71±0.21^一个	1.27±0.19^一个	0.73±0.14^一个
	3(很好)	40	1.14±0.57^一个	1.16±0.50^一个	1.15±0.42^一个	1.68±0.29^一个	1.26±0.18^一个	0.78±0.13^一个
	假定值		0.235	0.320	0.224	0.521	0.590	0.083
年龄(年)	< 1	10	1.21±0.31^ab	1.15±0.29^ab	1.18±0.17^b	1.74±0.19^b	1.37±0.21^b	0.77±0.08^一个
	[1 - 2]	14	0.78±0.41^一个	0.90±0.36^一个	0.84±0.34^一个	1.49±0.20^一个	1.13±0.12^一个	0.72±0.10^一个
	(2 - 3)	7	1.11±0.65^ab	1.04±0.41^ab	1.07±0.47^ab	1.62±0.21^ab	1.22±0.14^ab	0.72±0.12^一个
	[3 - 4]	56	1.23±0.57^b	1.28±0.47^b	1.26±0.41^b	1.76±0.24^b	1.29±0.18^b	0.76±0.16^一个
	假定值		0.034	0.028	0.005	0.005	0.006	0.657
怀孕状态	非怀孕	28	1.05±0.44^一个	0.99±0.42^一个	1.02±0.41^一个	1.64±0.25^一个	1.20±0.20^一个	0.72±0.16^一个
	怀孕了	59	1.19±0.59^一个	1.27±0.44^b	1.23±0.39^b	1.73±0.24^一个	1.30±0.17^b	0.77±0.13^一个
	假定值		0.298	0.005	0.026	0.078	0.004	0.060
黄体	缺席	15	0.90±0.44^一个	0.98±0.43^一个	0.94±0.41^一个	1.61±0.17^一个	1.12±0.17^一个	0.65±0.11^一个
	现在	72	1.20±0.56^一个	1.23±0.45^b	1.21±0.39^b	1.72±0.26^一个	1.30±0.17^b	0.77±0.14^b
	假定值		0.064	0.047	0.028	0.131	0.000	0.002

a,b,c每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)

N=母羊数量

SD =标准差

卵泡数量

从174个卵巢中，统计了1194个卵泡。每个卵巢平均卵泡数为8.80±2.97个。小(Φ小于2mm)、中(2≥Φ≤4mm)和大(4> Φ≤10mm)的卵泡分别占卵泡总数的87%、11%和2%。

卵母细胞的产量和质量

平均每个卵巢回收的卵母细胞数为6.04±1.01个(n = 607)，回收率为65%。I、II、III、IV级卵母细胞质量(图1)分别为1.20±0.18(11%)、1.23±0.23(14%)、1.13±0.12(7%)和2.47±0.93(68%)。用于体外胚胎产生的卵母细胞(IVEP) (G I和II)为每个卵巢2.43±0.41个(25%)。卵母细胞指数为1.98。

图1所示。a= I级卵母细胞;b=卵母细胞II级;c= III级卵母细胞;d=卵母细胞IV级

卵巢参数(卵巢定位、黄体、卵巢大小和重量)对卵泡数量、卵母细胞数量和等级的影响

右卵巢卵泡多于左卵巢(P>0.05)。左侧卵巢卵母细胞较多(P>0.05)。卵泡总数随卵巢重量(g)和大小(cm)的增加而增加;然而，卵母细胞的产量和质量随着卵巢的重量和大小而下降。另一方面，有黄体的卵巢可接受IVEP的卵泡和卵母细胞较少(表2和3)。

表2。卵巢因子对卵泡数量的影响。a,b，每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)。N=母羊数量

参数	变量	N	卵泡数			平均卵泡数/卵巢
			小(< 2mm)	中等([2-4]mm)	大(4-10毫米)	平均卵泡数/卵巢
卵巢本地化	左	87	5.86±3.03^一个	1.45±0.48^b	1.00±0.00^b	8.28±3.15^一个
	正确的	87	6.30±3.91^一个	1.72±0.77^一个	1.05±0.21^一个	9.06±3.92^一个
	假定值		0.420	007年0 . .	0.085	0.148
黄体	缺席	15	6.07±3.08^一个	1.83±0.20^b	1.00±0.00^一个	8.90±3.08^一个
	现在	72	6.15±2.89^一个	1.58±0.53^一个	1.07±0.05^b	8.81±2.98^一个
	假定值		0.995	0.000	0.000	0.901
卵巢重量(g)	＜1	27	6.55±3.47^一个	1.50±0.21^一个	1.00±0.00^一个	9.05±3.51^一个
	(1 - 1.50)	41	5.73±2.66^一个	1.62±0.52^一个	1.00±0.00^一个	8.35±2.77^一个
	> 1.50	19	6.70±2.38^一个	1.71±0.68^一个	1.10±0.11^b	9.51±2.39^一个
	假定值		0.340	0.146	0.000	0.185
子房大小(cm)^3.）	< 1.70 x1.26x0.75	50	5.94±2.84^一个	1.64±0.44^b	1.00±0.00^一个	8.58±2.88^一个
	> 1.70 x1.26x0.75	37	6.39±3.02^一个	1.56±0.57^一个	1.07±0.08^b	9.02±3.13^一个
	假定值		0.656	0.000	0.000	0.673

表3。卵巢因子对卵母细胞数量及分级的影响

参数	变量	N	平均卵母细胞数/卵巢	卵母细胞的成绩				选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
	变量	N	平均卵母细胞数/卵巢	我	2	3	4	选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
卵巢本地化	左	87	6.09±1.30^一个	1.17±0.24^b	1.42±0.44^b	1.03±0.11^一个	2.46±1.16^一个	2.59±0.49^b
	正确的	87	5.90±1.31^一个	1.14±0.22^一个	1.11±0.20^一个	1.16±0.25^b	2.49±1.26^一个	2.25±0.29^一个
	假定值		0.244	0.00	0.000	0.000	0.874	0.000
黄体	缺席	15	5.59±0.72^一个	1.27±0.24^b	1.25±0.23^一个	1.00±0.00^一个	2.07±0.75^一个	2.52±0.44^一个
	现在	72	6.14±1.06^一个	1.19±0.17^一个	1.23±0.24^一个	1.17±0.14^b	2.55±0.96^一个	2.42±0.25^一个
	假定值		0.170	0.003	0.055	0.000	0.051	0.193
卵巢重量(g)	＜1	27	6.20±1.24^一个	1.16±0.09^b	1.38±0.23^b	1.00±0.00^一个	2.66±1.12^一个	2.54±0.24^c
	(1 - 1.50)	41	5.82±0.84^一个	1.30±0.20^c	1.17±0.21^一个	1.13±0.12^b	2.21±0.83^一个	2.47±0.31^b
	> 1.50	19	6.46±0.91^一个	1.15±0.21^一个	1.21±0.26^一个	1.33±0.19^c	2.76±0.73^一个	2.36±0.31^一个
	假定值		0.089	0.000	0.001	0.000	0.087	0.003
子房大小(cm)^3.）	< 1.70 x1.26x0.75	50	6.15±1.10^一个	1.21±0.19^一个	1.25±0.25^b	1.23±0.16^b	2.46±1.03^一个	2.46±0.32^一个
	> 1.70 x1.26x0.75	37	5.97±0.89^一个	1.26±0.18^b	1.21±0.22^一个	1.00±0.00^一个	2.49±0.79^一个	2.47±0.25^一个
	假定值		0.614	0.000	0.000	0.000	0.908	0.916

a,b,c每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)

N=母羊数量

非卵巢参数(品种、年龄、BCS、状态和妊娠期长短)对卵泡数量、卵母细胞数量和等级的影响

小于3岁、BCS为3的母羊卵泡和卵母细胞总数较高。然而，未怀孕的母羊或前三个月发现怀孕的母羊也有大量的卵泡和良好的卵母细胞产量(表4和表5)。

表4．非卵巢因素对卵泡种群的影响

参数	变量	N	卵泡数			平均卵泡数/卵巢
	变量	N	小(< 2毫米)	中等([2-4]mm)	大(4-10毫米)	平均卵泡数/卵巢
品种	Djallonke	67	5.79±2.80^ab	1.54±0.43^b	1.00±0.00^一个	8.32±2.90^ab
	Kirdi	8	9.25±2.30^c	0.75±0.19^一个	1.00±0.00^一个	11.00±2.35^b
	梅奥科吉	4	3.38±1.75^一个	2.00±1.35^b	1.50±0.00^b	6.88±1.60^一个
	Peul	8	6.69±3.31^公元前	1.63±0.38^b	1.00±0.00^一个	9.31±3.31^ab
	假定值		0.003	0.000		0.049
BCS	1	2	8.50±1.41^一个	0.00±0.00^一个	0.50±0.00^一个	9.00±1.41^一个
	2	45	6.12±3.29^一个	1.70±0.59^b	1.17±0.06^b	8.99±3.28^一个
	3.	40	5.73±2.83^一个	1.44±0.33^b	1.00±0.00^c	8.16±2.94^一个
	假定值		0.098	0.000	0.000	0.658
年龄(年)	＜1	10	6.00±2.52^一个	2.19±0.65^b	0.50±0.00^b	8.69±2.56^ab
	[1 - 2]	14	7.50±3.28^一个	1.24±0.20^一个	1.00±0.00^c	9.74±3.34^b
	(2 - 3)	7	5.50±3.34^一个	1.50±0.29^一个	0.00±0.00^一个	7.00±3.48^一个
	[3 - 4]	56	5.83±2.87^一个	1.48±0.45^一个	1.10±0.06^d	8.41±2.92^ab
	假定值		0.132	0.000	0.000	0.246
怀孕状态	非怀孕	28	6.90±3.10^一个	1.56±0.43^一个	0.72±0.08^一个	9.18±3.24^一个
	怀孕了	59	5.78±2.76^一个	1.64±0.53^一个	1.10±0.06^b	8.52±2.81^一个
	假定值		0.140	0.028	0.000	0.403
妊娠天数(以天计)	(1-50)	19	6.26±3.28^一个	1.51±0.38^b	1.00±0.00^一个	8.78±3.51^一个
	(51 - 100)	27	5.62±2.72^一个	1.86±0.68^c	1.13±0.08^b	8.61±2.72^一个
	＞100	13	5.38±1.84^一个	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	7.38±1.84^一个
	假定值		0.374	0.000	0.000	0.172

a,b,c,d每列用字母表示组间差异有统计学意义(p<0.05)

N=母羊数量

表5所示。非卵巢因素对卵母细胞数量和分级的影响

参数	变量	N	平均卵母细胞数/卵巢	卵母细胞的成绩				选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
			平均卵母细胞数/卵巢	我	2	3	4	选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
品种	Djallonke	67	5.92±1.01^一个	1.22±0.19^b	1.21±0.23^ab	1.08±0.08^b	2.40±0.95^一个	2.44±0.30^b
	Kirdi	8	6.62±0.89^一个	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	1.25±0.32^c	3.37±0.83^b	2.00±0.00^一个
	梅奥科吉	4	4.54±0.63^b	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	0.66±0.23^一个	1.87±0.48^一个	2.00±0.00^一个
	Peul	8	6.11±0.66^一个	1.33±0.12^b	1.37±0.33^b	1.00±0.00^b	2.50±0.46^ab	2.61±0.34^b
	假定值		0.00	0.022	0.00	0.020	0.00	0.008
BCS	1	2	4.25±0.35^一个	0.50±0.00^一个	1.00±0.00^一个	0.00±0.00^一个	2.75±0.35^一个	1.50±0.00^一个
	2	45	6.17±0.35^b	1.61±0.18^b	1.27±0.24^b	1.15±0.11^b	2.59±1.00^一个	2.43±0.25^b
	3.	40	5.76±0.98^b	1.14±0.12^b	1.22±0.24^ab	1.11±0.15^b	2.30±0.91^一个	2.35±0.28^b
	假定值		0.041	0.000	0.204	0.000	0.442	0.000
年龄(年)	＜1	10	5.45±0.72^ab	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^b	2.45±0.72^一个	2.00±0.00^一个
	[1 - 2]	14	5.68±1.17^b	1.27±0.23^b	1.20±0.15^b	0.50±0.00^一个	2.71±1.05^一个	2.47±0.26^b
	(2 - 3)	7	5.83±1.12^b	1.00±0.00^一个	1.42±0.25^c	1.00±0.00^b	2.42±1.02^一个	2.42±0.25^b
	[3 - 4]	56	4.79±1.00^一个	1.22±0.20^b	1.28±0.26^公元前	1.18±0.15^c	2.42±0.94^一个	2.50±0.31^b
	假定值		0.154	0.000	0.001	0.000	0.489	0.000
怀孕状态	非怀孕	28	6.04±0.98^一个	1.43±0.24^b	1.25±0.26^一个	1.18±0.20^b	2.17±0.79^一个	2.68±0.37^b
	怀孕了	59	6.00±1.06^一个	1.04±0.06^一个	1.22±0.23^一个	1.13±0.08^一个	2.61±0.98^一个	2.26±0.23^一个
	假定值		0.852	0.000	0.518	0.045	0.067	0.000
妊娠天数(以天计)	(1-50)	19	6.22±1.27^b	1.00±0.00^一个	1.29±0.33^b	1.00±0.00^一个	2.92±1.10^b	2.29±0.33^b
	(51 - 100)	27	6.12±0.98^b	1.23±0.18^b	1.15±0.15^ab	1.13±0.08^b	2.62±0.94^ab	2.38±0.22^b
	＞100	13	5.36±0.68^一个	1.00±0.00^一个	1.08±0.13^一个	1.17±0.12^b	2.12±0.71^一个	2.08±0.13^一个
	假定值		0.000	0.000	0.023	0.003	0.072	0.054

a,b,c每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)

N=母羊数量

讨论

本研究母羊的品种特征表明，大量的Djallonke品种被屠宰，这与Kouamo观察到的相反等艾尔．[17]在马鲁阿的市政屠宰场，那里的富拉尼羊占主导地位。然而，屠宰母羊的平均年龄略高于Benchaib[18]和Kouamo的记录等艾尔．[17]。事实上，母羊的平均活重(27.25±4.16 kg)高于Ngona的报道等艾尔．[19]在刚果民主共和国(20.50±4.96公斤)和库阿莫等艾尔．[17](23.00±2.90 kg)。这种差异可以用大量怀孕母羊作为研究对象来解释。

妊娠率(68%)高于Manjeli的观察结果等．[20]在Garoua和Maroua屠宰场(38.60%);阿尔及利亚的Benchaib [18] (26.00%);娜娜等．[21]在dchanga市(49%)和Kouamo市等艾尔．[17]马鲁阿市屠宰场(45.30%)。另一方面，这一比率低于Pitala等．[22]在多哥(80.10%)。这种差异可能与研究时间和品种有关[17]。据Manjeli报道等．[20];Pitala等．[22]在多哥和纳纳等．[21]在喀麦隆，大多数被屠宰的怀孕母羊都在妊娠的前三个月内。这一方面可以解释为，屠杀怀孕的雌性动物不仅是因为对动物的生理状态一无所知，因为它们的外表清楚地表明了它们的生理状态;但更多的是由于我国小反刍动物养殖的社会经济背景，它被认为是一种自给自足的农业，无论动物的生理状态如何，都能解决迫切的需求[20]。事实上，通过屠杀怀孕的雌性，人类通过灭绝未来的繁殖者，从根本上攻击了生殖[21]。

卵巢平均重量(1.16±0.49 g)低于Mohamed报道等．[14](1.30±0.23 g)，高于伊斯兰教等．[23](0.69±0.01 g)。这种差异可能是由于品种的影响。卵巢的平均尺寸比伊斯兰教略大等艾尔．[23]穆罕默德等．[14]。这表明黄体的存在对卵巢的尺寸有积极的影响，因为黄体是由排卵的卵泡形成的，在卵巢表面向四面八方发育。然而，伊斯兰教也报道了左右卵巢的区别等艾尔．[23],默罕默德等．[14]王晓明等．[7]。事实上，右侧卵巢排卵更明显。右卵巢的这种更大的活动可能是其体重的原因。

平均卵泡数(8.80±2.97)高于Mohamed组等．[14](4.9±0.89)等艾尔．[24](7.46±0.14)。然而，据Mohamed报道，直径小于2mm的卵泡数量高于直径大于2mm的卵泡数量等．[14]。切片技术允许恢复所有卵泡中存在的所有卵母细胞，而不管它们在卵巢皮层上的位置如何。每卵巢平均卵母细胞产量为6.04±1.01个。这个值比Wani观察到的要高等艾尔．[24](5.87±0.08卵母细胞)和Rameez等．[6]印度山羊(4.51±0.25个卵母细胞)。这种差异可能是由于所使用的收集技术。而右卵巢卵泡活性较大，大卵泡数量较多(P<0.05)[14]。右侧卵巢卵泡总数较高[14,25,26]。然而，与有黄体的卵巢相比，没有黄体的卵巢有更多的卵母细胞可用于IVEP[7,14,27]。这可能是由于卵泡发育受限，因为叶黄素细胞占据了卵巢的很大一部分[6]。也可能是由于黄体可以抑制卵泡的生长并增加其闭锁[28]。

未怀孕母羊卵巢中卵泡可接受等级的卵母细胞总数高于其他母羊[29];然而,环境影响评价等艾尔．[25]从怀孕的雌性水牛身上获得了大量的卵泡。

结论

总之，本研究表明喀麦隆本地母羊的卵巢产生用于IVEP的可接受的卵母细胞的潜力很低。未来的研究必须考虑某些参数，如BCS、年龄和生理状态，以最大限度地提高IVEP的成功率。

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编辑信息

主编

埃米尔Sreboč一
萨格勒布大学，克罗地亚

文章类型

研究文章

出版的历史

收稿日期:2020年7月8日
录用日期:2020年7月15日
发布日期:2020年7月22日

版权

引用

Justin Kouamo(2020)一项实地研究，以确定中欧东欧奶牛群中与亚临床酮症相关的新鲜奶牛临床状况。畜牧畜牧兽医科学4:DOI:10.15761/AHDVS.1000179

相应的作者

贾斯汀Kouamo

恩oundere大学兽医学院，喀麦隆恩oundere邮政信箱454号

电子邮件:bhuvaneswari.bibleraaj@uhsm.nhs.uk

图1所示。a= I级卵母细胞;b=卵母细胞II级;c= III级卵母细胞;d=卵母细胞IV级

表1。卵巢重量和大小、品种、BCS、年龄、妊娠状况和黄体的平均值±SD值

参数	变量	N	左卵巢重量(g)	右卵巢重量(g)	每只动物卵巢重量(g)	子房长度(cm)	子房宽度(cm)	子房厚度(cm)
品种	Djallonke	67	1.13±0.53^ab	1.19±0.44^一个	1.16±0.38^ab	1.69±0.24^一个	1.27±0.17^b	0.75±0.14^ab
	Kirdi	8	0.78±0.51^一个	0.97±0.46^一个	0.87±0.46^一个	1.51±0.18^一个	1.07±0.05^一个	0.64±0.06^一个
	梅奥科吉	4	1.47±0.30^b	0.95±0.44^一个	1.21±0.34^ab	1.71±0.16^一个	1.20±0.13^b	0.74±0.10^ab
	Peul	8	1.52±0.59^ab	1.48±0.45^一个	1.50±0.41^b	2.01±0.15^b	1.48±0.17^c	0.85±0.15^b
	假定值		0.045	0.095	0.039	0.001	0.000	0.019
BCS	1(薄)	2	1.60±0.01^一个	1.64±0.05^一个	1.62±0.03^一个	1.83±0.04^一个	1.35±0.05^一个	0.72±0.11^一个
	2(中)	45	1.13±0.54^一个	1.18±0.42^一个	1.16±0.39^一个	1.71±0.21^一个	1.27±0.19^一个	0.73±0.14^一个
	3(很好)	40	1.14±0.57^一个	1.16±0.50^一个	1.15±0.42^一个	1.68±0.29^一个	1.26±0.18^一个	0.78±0.13^一个
	假定值		0.235	0.320	0.224	0.521	0.590	0.083
年龄(年)	< 1	10	1.21±0.31^ab	1.15±0.29^ab	1.18±0.17^b	1.74±0.19^b	1.37±0.21^b	0.77±0.08^一个
	[1 - 2]	14	0.78±0.41^一个	0.90±0.36^一个	0.84±0.34^一个	1.49±0.20^一个	1.13±0.12^一个	0.72±0.10^一个
	(2 - 3)	7	1.11±0.65^ab	1.04±0.41^ab	1.07±0.47^ab	1.62±0.21^ab	1.22±0.14^ab	0.72±0.12^一个
	[3 - 4]	56	1.23±0.57^b	1.28±0.47^b	1.26±0.41^b	1.76±0.24^b	1.29±0.18^b	0.76±0.16^一个
	假定值		0.034	0.028	0.005	0.005	0.006	0.657
怀孕状态	非怀孕	28	1.05±0.44^一个	0.99±0.42^一个	1.02±0.41^一个	1.64±0.25^一个	1.20±0.20^一个	0.72±0.16^一个
	怀孕了	59	1.19±0.59^一个	1.27±0.44^b	1.23±0.39^b	1.73±0.24^一个	1.30±0.17^b	0.77±0.13^一个
	假定值		0.298	0.005	0.026	0.078	0.004	0.060
黄体	缺席	15	0.90±0.44^一个	0.98±0.43^一个	0.94±0.41^一个	1.61±0.17^一个	1.12±0.17^一个	0.65±0.11^一个
	现在	72	1.20±0.56^一个	1.23±0.45^b	1.21±0.39^b	1.72±0.26^一个	1.30±0.17^b	0.77±0.14^b
	假定值		0.064	0.047	0.028	0.131	0.000	0.002

a,b,c每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)

N=母羊数量

SD =标准差

表2。卵巢因子对卵泡数量的影响。a,b，每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)。N=母羊数量

参数	变量	N	卵泡数			平均卵泡数/卵巢
			小(< 2mm)	中等([2-4]mm)	大(4-10毫米)	平均卵泡数/卵巢
卵巢本地化	左	87	5.86±3.03^一个	1.45±0.48^b	1.00±0.00^b	8.28±3.15^一个
	正确的	87	6.30±3.91^一个	1.72±0.77^一个	1.05±0.21^一个	9.06±3.92^一个
	假定值		0.420	007年0 . .	0.085	0.148
黄体	缺席	15	6.07±3.08^一个	1.83±0.20^b	1.00±0.00^一个	8.90±3.08^一个
	现在	72	6.15±2.89^一个	1.58±0.53^一个	1.07±0.05^b	8.81±2.98^一个
	假定值		0.995	0.000	0.000	0.901
卵巢重量(g)	＜1	27	6.55±3.47^一个	1.50±0.21^一个	1.00±0.00^一个	9.05±3.51^一个
	(1 - 1.50)	41	5.73±2.66^一个	1.62±0.52^一个	1.00±0.00^一个	8.35±2.77^一个
	> 1.50	19	6.70±2.38^一个	1.71±0.68^一个	1.10±0.11^b	9.51±2.39^一个
	假定值		0.340	0.146	0.000	0.185
子房大小(cm)^3.）	< 1.70 x1.26x0.75	50	5.94±2.84^一个	1.64±0.44^b	1.00±0.00^一个	8.58±2.88^一个
	> 1.70 x1.26x0.75	37	6.39±3.02^一个	1.56±0.57^一个	1.07±0.08^b	9.02±3.13^一个
	假定值		0.656	0.000	0.000	0.673

表3。卵巢因子对卵母细胞数量及分级的影响

参数	变量	N	平均卵母细胞数/卵巢	卵母细胞的成绩				选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
	变量	N	平均卵母细胞数/卵巢	我	2	3	4	选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
卵巢本地化	左	87	6.09±1.30^一个	1.17±0.24^b	1.42±0.44^b	1.03±0.11^一个	2.46±1.16^一个	2.59±0.49^b
	正确的	87	5.90±1.31^一个	1.14±0.22^一个	1.11±0.20^一个	1.16±0.25^b	2.49±1.26^一个	2.25±0.29^一个
	假定值		0.244	0.00	0.000	0.000	0.874	0.000
黄体	缺席	15	5.59±0.72^一个	1.27±0.24^b	1.25±0.23^一个	1.00±0.00^一个	2.07±0.75^一个	2.52±0.44^一个
	现在	72	6.14±1.06^一个	1.19±0.17^一个	1.23±0.24^一个	1.17±0.14^b	2.55±0.96^一个	2.42±0.25^一个
	假定值		0.170	0.003	0.055	0.000	0.051	0.193
卵巢重量(g)	＜1	27	6.20±1.24^一个	1.16±0.09^b	1.38±0.23^b	1.00±0.00^一个	2.66±1.12^一个	2.54±0.24^c
	(1 - 1.50)	41	5.82±0.84^一个	1.30±0.20^c	1.17±0.21^一个	1.13±0.12^b	2.21±0.83^一个	2.47±0.31^b
	> 1.50	19	6.46±0.91^一个	1.15±0.21^一个	1.21±0.26^一个	1.33±0.19^c	2.76±0.73^一个	2.36±0.31^一个
	假定值		0.089	0.000	0.001	0.000	0.087	0.003
子房大小(cm)^3.）	< 1.70 x1.26x0.75	50	6.15±1.10^一个	1.21±0.19^一个	1.25±0.25^b	1.23±0.16^b	2.46±1.03^一个	2.46±0.32^一个
	> 1.70 x1.26x0.75	37	5.97±0.89^一个	1.26±0.18^b	1.21±0.22^一个	1.00±0.00^一个	2.49±0.79^一个	2.47±0.25^一个
	假定值		0.614	0.000	0.000	0.000	0.908	0.916

a,b,c每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)

N=母羊数量

表4．非卵巢因素对卵泡种群的影响

参数	变量	N	卵泡数			平均卵泡数/卵巢
	变量	N	小(< 2毫米)	中等([2-4]mm)	大(4-10毫米)	平均卵泡数/卵巢
品种	Djallonke	67	5.79±2.80^ab	1.54±0.43^b	1.00±0.00^一个	8.32±2.90^ab
	Kirdi	8	9.25±2.30^c	0.75±0.19^一个	1.00±0.00^一个	11.00±2.35^b
	梅奥科吉	4	3.38±1.75^一个	2.00±1.35^b	1.50±0.00^b	6.88±1.60^一个
	Peul	8	6.69±3.31^公元前	1.63±0.38^b	1.00±0.00^一个	9.31±3.31^ab
	假定值		0.003	0.000		0.049
BCS	1	2	8.50±1.41^一个	0.00±0.00^一个	0.50±0.00^一个	9.00±1.41^一个
	2	45	6.12±3.29^一个	1.70±0.59^b	1.17±0.06^b	8.99±3.28^一个
	3.	40	5.73±2.83^一个	1.44±0.33^b	1.00±0.00^c	8.16±2.94^一个
	假定值		0.098	0.000	0.000	0.658
年龄(年)	＜1	10	6.00±2.52^一个	2.19±0.65^b	0.50±0.00^b	8.69±2.56^ab
	[1 - 2]	14	7.50±3.28^一个	1.24±0.20^一个	1.00±0.00^c	9.74±3.34^b
	(2 - 3)	7	5.50±3.34^一个	1.50±0.29^一个	0.00±0.00^一个	7.00±3.48^一个
	[3 - 4]	56	5.83±2.87^一个	1.48±0.45^一个	1.10±0.06^d	8.41±2.92^ab
	假定值		0.132	0.000	0.000	0.246
怀孕状态	非怀孕	28	6.90±3.10^一个	1.56±0.43^一个	0.72±0.08^一个	9.18±3.24^一个
	怀孕了	59	5.78±2.76^一个	1.64±0.53^一个	1.10±0.06^b	8.52±2.81^一个
	假定值		0.140	0.028	0.000	0.403
妊娠天数(以天计)	(1-50)	19	6.26±3.28^一个	1.51±0.38^b	1.00±0.00^一个	8.78±3.51^一个
	(51 - 100)	27	5.62±2.72^一个	1.86±0.68^c	1.13±0.08^b	8.61±2.72^一个
	＞100	13	5.38±1.84^一个	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	7.38±1.84^一个
	假定值		0.374	0.000	0.000	0.172

a,b,c,d每列用字母表示组间差异有统计学意义(p<0.05)

N=母羊数量

表5所示。非卵巢因素对卵母细胞数量和分级的影响

参数	变量	N	平均卵母细胞数/卵巢	卵母细胞的成绩				选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
			平均卵母细胞数/卵巢	我	2	3	4	选择用于IVEP的卵母细胞。I和II
品种	Djallonke	67	5.92±1.01^一个	1.22±0.19^b	1.21±0.23^ab	1.08±0.08^b	2.40±0.95^一个	2.44±0.30^b
	Kirdi	8	6.62±0.89^一个	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	1.25±0.32^c	3.37±0.83^b	2.00±0.00^一个
	梅奥科吉	4	4.54±0.63^b	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	0.66±0.23^一个	1.87±0.48^一个	2.00±0.00^一个
	Peul	8	6.11±0.66^一个	1.33±0.12^b	1.37±0.33^b	1.00±0.00^b	2.50±0.46^ab	2.61±0.34^b
	假定值		0.00	0.022	0.00	0.020	0.00	0.008
BCS	1	2	4.25±0.35^一个	0.50±0.00^一个	1.00±0.00^一个	0.00±0.00^一个	2.75±0.35^一个	1.50±0.00^一个
	2	45	6.17±0.35^b	1.61±0.18^b	1.27±0.24^b	1.15±0.11^b	2.59±1.00^一个	2.43±0.25^b
	3.	40	5.76±0.98^b	1.14±0.12^b	1.22±0.24^ab	1.11±0.15^b	2.30±0.91^一个	2.35±0.28^b
	假定值		0.041	0.000	0.204	0.000	0.442	0.000
年龄(年)	＜1	10	5.45±0.72^ab	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^一个	1.00±0.00^b	2.45±0.72^一个	2.00±0.00^一个
	[1 - 2]	14	5.68±1.17^b	1.27±0.23^b	1.20±0.15^b	0.50±0.00^一个	2.71±1.05^一个	2.47±0.26^b
	(2 - 3)	7	5.83±1.12^b	1.00±0.00^一个	1.42±0.25^c	1.00±0.00^b	2.42±1.02^一个	2.42±0.25^b
	[3 - 4]	56	4.79±1.00^一个	1.22±0.20^b	1.28±0.26^公元前	1.18±0.15^c	2.42±0.94^一个	2.50±0.31^b
	假定值		0.154	0.000	0.001	0.000	0.489	0.000
怀孕状态	非怀孕	28	6.04±0.98^一个	1.43±0.24^b	1.25±0.26^一个	1.18±0.20^b	2.17±0.79^一个	2.68±0.37^b
	怀孕了	59	6.00±1.06^一个	1.04±0.06^一个	1.22±0.23^一个	1.13±0.08^一个	2.61±0.98^一个	2.26±0.23^一个
	假定值		0.852	0.000	0.518	0.045	0.067	0.000
妊娠天数(以天计)	(1-50)	19	6.22±1.27^b	1.00±0.00^一个	1.29±0.33^b	1.00±0.00^一个	2.92±1.10^b	2.29±0.33^b
	(51 - 100)	27	6.12±0.98^b	1.23±0.18^b	1.15±0.15^ab	1.13±0.08^b	2.62±0.94^ab	2.38±0.22^b
	＞100	13	5.36±0.68^一个	1.00±0.00^一个	1.08±0.13^一个	1.17±0.12^b	2.12±0.71^一个	2.08±0.13^一个
	假定值		0.000	0.000	0.023	0.003	0.072	0.054

a,b,c每列不同字母表示组间差异显著(p<0.05)

N=母羊数量

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